旗赛生物科技(武汉)有限公司
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产品简介
间充质干细胞成骨诱导分化培养基是一款专用于间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化成骨细胞的培养基。可用于骨髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成骨分化。
详细信息
组分名称 | 组分规格 | 组分货号 | 保存条件 | 有效期 |
间充质干细胞成骨诱导基础培养基 | 167ml | QS-S501-A | 2~8℃ | 12 months |
间充质干细胞成骨诱导添加物 | 13ml | QS-S501-B | -20℃ | 12 months |
间充质干细胞成骨诱导胎牛血清 | 20ml | QS-S501-C | -20℃ | 24 months |
使用方法
1. 成骨诱导分化操作步骤
1.1 明胶包被培养器皿
干细胞培养较长时间后,可能会出现脱壁卷边或漂浮现象,建议使用0.1%明胶溶液对培养器皿进行包被。准备合适的培养器皿,取适量明胶覆盖底面,37°C静置30 min,吸取晾干即可使用。
1.2 接种干细胞
取对数生长期的细胞,按照1.0-2.0×104 cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO2培养环境下培养至汇合度60~70%,弃掉上清,加入成骨诱导分化培养基。
1.3 细胞分化诱导
每2~3天换液一次,于37℃,5% CO2培养环境下培养约14~21天,并注意观察细胞形态变化。根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
2. 染色鉴定
2.1 细胞固定
吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30~60 min,弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。
2.2 茜素红染色
加入适量茜素红染色液染3~5 min,吸走茜素红染色液,用1×PBS清洗两次,并加入适量1×PBS避免细胞干燥。
2.3 诱导评估
显微镜下观察成骨染色效果,并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时,钙质结节与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色。
NOTE: 干细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来源,培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。
注意事项
1. 本产品组分均为无菌分装,可直接配制成完全培养基使用。
2. 完全培养基储存条件:2~8℃,避光;配制后有效期:2 weeks,配制后请在有效期内使用完毕。
3. 本品可分装冻存,避免反复冻融,使用时注意无菌操作。
4. 本产品仅用于科研实验,不可用于临床治疗。