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细胞背景介绍:
细胞来源:正常大鼠主动脉组织
主动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。
刚分离的血管外膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。外膜是专门的支持组织,外膜成纤维是外膜的主要成分,在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。
分离方法简介:
大鼠原代主动脉外膜成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法制备而来。
细胞培养信息:
细胞名称 | 原代大鼠主动脉外膜成纤维细胞 |
培养条件 | 大鼠主动脉外膜成纤维细胞完全培养基 |
气相:空气,95%;CO2,5% | |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
换液频率 | 2-3天/次 |
传代特性 | 可传3-5代,3代以内状态最佳;首次传代建议1:2传代 |
注意事项 | 消化液选择0.25%胰酶+0.02%EDTA |
细胞鉴定:
免疫荧光鉴定指标:Vimentin;纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。